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  [摘要] 目的 运用RNA干扰 (RNAi)技术沉默人气道上皮细胞株9HTE的核因子κB(NF-κB)/p65基因,探讨NF-κB/p65的活化在C反应蛋白 (CRP)诱导的人气道上皮细胞凋亡中的作用及调控机制。方法 体外培养人气道上皮细胞株 9HTE,利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的NF-κB/p65小干扰RNA (siRNA)转染入9HTE细胞,给予终浓度50μg/L的CRP刺激24h,免疫组织化学检测NF-κB/p65的活化,反转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测NF-κB/p65、Bcl-2和BaxmRNA的表达,Westernblot检测Bcl-2和Bax蛋白的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果 化学合成的NF-κB/p65siRNA可以抑制9HTE细胞NF-κB/p65mRNA的表达及NF-κB/p65的活化,与CRP组和CRP+scramblesiRNA组相比,NF-κB/p65siRNA组Bcl-2mRNA和蛋白表达明显减少 (P<0 05),BaxmRNA和蛋白表达明显增加 (P <0 05),流式细胞仪显示NF-κB/p65siRNA组细胞凋亡率明显降低 (P <0 05)。结论 利用siRNA干扰沉默NF-κB/p65基因,可以有效抑制CRP介导的气道上皮细胞凋亡,表明NF-κB的活化可以促进气道上皮细胞中的凋亡,其机制之一可能是通过调控Bcl-2和Bax的表达发挥诱导细胞凋亡的作用。

  [Abstract]

  [关键词] RNA干扰;C反应蛋白质;核因子κB;细胞凋亡;上皮细胞

  [Key words]

  [中图分类号]

  [DOI] 10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2019.01.008

  [基金项目]

  [作者简介]

  [作者单位] 南昌大学第一附属医院呼吸内科 南昌县人民医院呼吸内科; 九江市濂溪区人民医院内科

【参考文献】